Diversidad de cepas de Agrobacterium rubi aisladas de arándanos / Agrobacterium rubi strains from blueberry plants are highly diverse

Se estudió la diversidad de una colección de cepas de Agrobacterium rubi aisladas de arándanos provenientes de distintas regiones de la República Argentina estableciendo su grado de heterogeneidad mediante pruebas microbiológicas clásicas y técnicas de biología molecular. Los resultados obtenidos en las pruebas bioquímicas y fisiológicas, así como mediante rep-PCR y RFLP del gen 23S ADNr, demostraron una alta variabilidad intraespecífica, tanto fenotípica como genotípica

The diversity of a collection of Agrobacterium rubi strains isolated from blueberries from different regions of Argentina was studied by conventional microbiological tests and molecular techniques. Results from biochemical and physiological reactions, as well as from rep-PCR and RFLP analysis of PCR-amplified 23S rDNA showed high phenotypic and genotypic intraspecific variation

Evaluación del método epsilométrico Etest para la determinación de la sensibilidad a tetraciclina en Paenibacillus larvae, agente causal de la loque americana de las abejas / [Evaluation of the Epsilometer (Etest) method for the detection of tetracycline susceptibility in Paenibacillus larvae, the causal agent of American foulbrood disease of honeybees].

American foulbrood (AFB) is a bacterial disease caused by the spore-forming, grampositive bacterium Paenibacillus larvae, which affects honeybee broods worldwide. The aim of this work was to compare the Epsilometer test (Etest) to the agar dilution method for testing a collection of 22 P. larvae strains to tetracycline by using MYPGP and Iso- Sensitest agars. Results showed that a categorical agreement of 100

was found when using Iso-Sensitest, while a categorical agreement of 86.36

was found (with 3 minor errors) when MYPGP was tested. In conclusion, the Etest could be a rapid and reliable method for testing MIC values of tetracycline in P. larvae only when used in combination with Iso-Sensitest agar. Nevertheless, these results should be confirmed with future studies involving a larger number of isolates.

Métodos para la detección de Agrobacterium a partir de muestras de material vegetal, suelo y agua / Methods for the detection of Agrobacterium from plant, soil and water samples

El género Agrobacterium incluye especies ftopatógenas que inducen la formación de agallas en el cuello o la proliferación de raíces en cabellera en más de 600 especies de dicotiledóneas, y especies no patógenas cuyo hábitat natural es el suelo. Como no es posible erradicar a las especies patógenas y habida cuenta de que más del 80 % de las infecciones puede provenir de viveros, es importante evitar la diseminación de la enfermedad. Por ello, el objetivo de este trabajo ha sido desarrollar técnicas sensibles y precisas que, aisladamente o combinadas, permitan detectar la presencia de especies y biovares de Agrobacterium a partir de muestras de material vegetal, suelo y agua. Se comprobó que con la estrategia combinada de realizar aislamientos en los medios semiselectivos D1, D1-M y YEM-RCT; PCR multiplex sobre el gen 23S ADNr; PCR específca sobre los genes virC1 y virC2 y bioensayos en plántulas de pimiento cv. California Wonder y en hojas cortadas de kalanchoe, se reduce la posibilidad de obtener falsos negativos y/o falsos positivos. Por lo expuesto, esta combinación de técnicas constituye una herramienta adecuada para el diagnóstico de cepas patógenas de Agrobacterium a partir de distintos tipos de muestras.

The genus Agrobacterium includes phytopathogenic bacteria that induce the development of root crown galls and/or aerial galls at the base of the stem or hairy roots on more than 600 species of plants belonging to 90 dicotyledonous families and non-pathogenic species. These bacteria being natural soil inhabitants are particularly diffcult to eradicate, which is a problem in nurseries where more than 80% of infections occur. Since early detection is crucial to avoid the inadvertent spread of the disease, the aim of this work was to develop sensitive and precise identifcation techniques by using a set of semi-selective and differential culture media in combination with a specifc PCR to amplify a partial sequence derived from the virC operon, as well as a multiplex PCR on the basis of 23SrDNA sequences, and biological assays to identify and differentiate species and biovars of Agrobacterium obtained either from soil, water or plant samples. The combination of the different assays allowed us to reduce the number of false positive and negative results from bacteria isolated from any of the three types of samples. Therefore, the combination of multiplex PCR, specifc PCR, isolations in semi-selective D1, D1-M and YEM-RCT media combined with bioassays on cut leaves of Kalanchoe and seedlings of California Wonder pepper cultivar constitute an accurate tool to detect species and biovars of Agrobacterium for diagnostic purposes.

Evaluación de medios de cultivo para detectar la reacción de hidrólisis del almidón por patovares de Xanthomonas campestris / Evaluation of culture media for detecting the starch hydrolysis reaction in pathovars of Xanthomonas campestris

Se emplearon 60 cepas de diferentes patovares de Xanthomonas campestris para evaluar la reacción de hidrólisis del almidón y compuestos intermedios de degradación del mismo en diferentes medios de cultivo: almidón solubre, almidón de papa, almidón insolubre de maíz, amilopectina de papa, amilopectina de maíz y amilosa de papa. El 74% de las cepas presentó reacción positiva en los 6 medios. De las restantes, los patovares holcicola, pelargonii, pruni y vitians dieron reacción negativa y, las cepas de X. campestris pv. vesicolatoria mostraron resultados variables. Los medios que contienen almidones insolubles de papa y de maíz manifestaron mayores ventajas para determinar la reacción de hidrólisis no solamente por la claridad y tamaño de los halos formados sino también por su utilidad para aislamientos directos. La reacción de hidrólisis del almidón serviría como un carácter complementario para diferenciar especies de Xanthomonas, pero no sería válida para separar a los patovares del grupo de X. campestris debido a la variación suficiente que existe entre ellos pese al alto porcentaje de reacciones positivas detectadas

Cancrosis del níspero: una nueva enfermedad para la Argentina / Loquat canker: a new disease for Argentina

Se detectó por primera vez en la Argentina, la cancrosis del níspero (Eriobotrya pajonica [Thumb.] Lindl.) ocasionada por Pseudomonas syringae pv. eriobotryae (Takimoto) Young, Dye y Wilkie. Los síntomas consistían en cancros secos y profundos en las ramas, los cuales en estadíos más avanzados llegaban a roder totalmente a los brotes terminales y ramas. Cancros similares se observron en las nervaduras principales de las hojas. Se aislaron 7 cepas bacterianas del material naturalmente infectado, las cuales se identificaron según las caracteristicas culturales y bioquímicas, sintomatología y pruebas de patogenicidad. Tdoas las cepas produjeron levano y dieron reacción de hipersensibilidad en hojas de tabaco. No produjeron oxidasa ni arginina dehidrolas. En medio King B dieron fluorescencia a la luz UV como consecuencia de la producción de piverdina. Se detectó también un pigmento marrón que difundía en los medios King B, SPA y Tween 80. Luego de 5-7 días de incubación también se registró lipólisis del Tween 80. Ls síntomas observados a campo y los obtenidos en las inoculaciones artificiales fueron los mismo que los descriptos para Pseudomonas syringae pv. eriobotryae en la bibliografía consultada

Caracterización de Xanthomonas campestris pv. cucurbitae, agente causal de la mancha bacteriana del zapallo / Characterization of Xanthomonas campestris pv. cucurbitae, causal agent of the bacterial spot of squash

En este trabajo se realizó por primera vez en la Argentina, la caracterización del agente causal de la mancha bacteriana del zapallo. Al mismo tiempo, se probó su patogenicidad sobre distintas Cucubitaceae. El patógeno aislado de zapallito redondo de tronco (Cucubita maxima var. zapllito) fue Xanthomonas campestris pv. cucurbitae (Bryan) Dye. La identificación del mismo se basó en la sintomatología observada y en sus caracteres culturales, morfológicos y fisiológicos. En inoculaciones cruzadas, la bacteria resultó patógena para zapallo, zapallito, pepino y sandía y no lo fue para melón